The dispersion of adhered marine bacteria by pyrophosphate and ultrasound prior to direct counting.

Type Proceedings paper
Date 1984-10
Language English
Author(s) Velji M, Albright L
Meeting 2. Colloque International de Bacteriologie Marine, Brest (France), 1-5
Source Actes de colloques. Ifremer Brest [ACTES COLLOQ. IFREMER.]. 1986
French abstract Une technique pour disperser les bactéries marines des différentes surfaces avant les numérations directes a été testée. Les cellules bactériennes sont fixées et rendues plus fermes par addition de formaldehyde à 3.7% (concentration finale v/v). Les échantillons d'eau de mer sont ensuite traités par une solution de tetrasodium pyrophosphate 0.001 M (concentration finale), utilisée comme agent défloculant et séquestrant. Les échantillons de la surface du sédiment et des grandes algues sont traités par une solution 0.01 M de tetrasodium pyrophosphate (concentration finale) dans une solution de chlorure de sodium 0.44 M. Ils sont alors incubés 15 à 30 mn avant d'être traités aux ultrasons (100 W) pendant 30 à 45 s. Cette technique permet la dispersion de la majorité des bactéries dans l'échantillon. Les cellules bactériennes, dispersées par cette technique, sont ensuite colorées par du 4',6 diamino -2-phénylindole (DAPI) et dénombrées en microscopie à épifluorescence. Les populations bactériennes du sédiment de surface et des lames âgées d'algues, qu'il était jusque-là difficile ou même impossible de dénombrer, sont maintenant aisément quantifiées. Un mécanisme est proposé pour expliquer l'augmentation de la dispersion des cellules par cette méthode.
Keyword(s) Bacteria, Microbiological analysis, Flocculation, Ultrasonics, Bacterial counters
Abstract A technique has been investigated for dispersing adhered marine bacteria from various surfaces prior to direct counting. The bacterial cells were initially preserved and strengthened by use of 3.7% formaldehyde (v/v final concentration). Seawater samples were then treated with 0.001 M of tetrasodium pyrophosphate (final concentration), a sequestering and deflocculating agent. Surface sediment and kelp disc samples were treated with 0.01 M tetrasodium pyrophosphate (final concentration) after having been suspended in 0.44 M sodium chloride solution. These samples were incubated for 15-30 min. Subsequently, the samples were treated with ultrasound (100 W) for 30 to 45 s. This technique resulted in an even dispersion of most bacterial cells in the samples. Bacterial cells dispersed in this manner were then stained with 4',6-diamino-2-phenylindole (DAPI) and enumerated by standard epifluorescent microscopy. Bacterial populations of surface sediment and older kelp blades which were previously difficult or impossible to enumerate were now found to be easily determined. A mechanism is proposed to explain the increase in dispersion of the bacterial cells by this technique.
Full Text
File Pages Size Access
acte-968.pdf 11 936 KB Open access
Top of the page

How to cite 

Velji M, Albright L (1984). The dispersion of adhered marine bacteria by pyrophosphate and ultrasound prior to direct counting. Actes de colloques. Ifremer Brest [ACTES COLLOQ. IFREMER.]. 1986. https://archimer.ifremer.fr/doc/00000/968/