| Résumé |
Le problème majeur allant à l'encontre du développement de l'aquaculture dans le monde, en particulier pour l'élevage des mollusques, est lié à des maladies infectieuses. Les agents responsables sont essentiellement des parasites et des microorganismes intracellulaires. Les données acquises en pathologie des mollusques sont à l'heure actuelle en majorité descriptives, mais compte tenu de l'impact économique de ces maladies, des recherches doivent être développées pour élaborer des mesures prophylactiques et thérapeutiques. Dans cette optique l'établissement de lignées cellulaires de mollusques marins constitue une priorité car, à l'instar des lignées cellulaires de vertébrés utilisées en pathologie humaine et vétérinaire, elles permettraient la production in vitro des agents pathogènes et de ce fait d'appréhender l'étude des relations hote-pathogène à l'échelle cellulaire et moléculaire. Par ailleurs dans une optique plus finalisée, elles contribueraient à la mise au point de diagnostic fiable des agents pathogènes et la sélection expérimentale d'animaux résistants aux maladies. Depuis une vingtaine d'années des essais ont été menés de façon fragmentaire par diverses équipes, mais à ce jour il n'existe toujours pas de lignée cellulaire de mollusque marin. Nos travaux ont donc porté sur l'élaboration des bases méthodologiques. Ainsi, nous avons pu établir des protocoles d'aseptisation adaptés aux différents tissus adultes ou larvaires. Sur la base des caractéristiques biochimiques et physio chimiques de l'hémolymphe des bivalves et des connaissances acquises en culture de cellules animales, nous avons ensuite élaboré un milieu de culture. Celui-ci a alors été utilisé pour la réalisation de nombreuses primocultures de cellules de l'huître plate Ostrea edulis. Les cultures les plus dynamiques se sont avérées être d'origine larvaire bien que des survies cellulaires de plusieurs semaines aient été obtenues pour plusieurs tissus d'huîtres adultes. Par ailleurs ce milieu a permis le développement du parasite Bonamia ostreae dans des hemocytes maintenus in vitro pendant quelques semaines. Compte tenu de l'importance que revêt l'établissement d'une lignée cellulaire de bivalves pour le développement des études en pathologie des mollusques, nos travaux seront poursuivis en multipliant les primocultures de cellules de larves grâce à la production de l'écloserie expérimentale IFREMER de La Tremblade. Parallèlement des amendements du milieu de culture seront appréhendés par complémentation avec différentes fractions telles que, hémolymphe homologue ou extraits de ganglions cérébroïdes. D'autre part des essais d'induction de tumeurs seront entrepris par cancérogenèse chimique ou virale afin de disposer de cellules cancereuses susceptibles de se multiplier in vitro. |
