FN Archimer Export Format
PT J
TI Homologous ELISA procedure for the determination of penaeid shrimp vitellogenin
OT Un test ELISA homologué pour la détermination de la vitellogénine de crevettes pénéidés
BT 
AF MENDOZA, Roberto
   GUILLAUME, Jean-Charles
   FAUVEL, Christian
AS 1:1;2:2;3:2;
FF 1:;2:;3:;
C1 Univ Autonoma Nuevo Leon, Fac Ciencias Biol, San Nicolas Garzas 66450, NL, Mexico.
   IFREMER, Inst Francais Rech Exploitat Mer, F-29280 Plouzane, France.
C2 UNIV AUTONOMA NUEVO LEON, MEXICO
   IFREMER, FRANCE
IN WOS Ifremer jusqu'en 2018
IF 0.942
TC 19
UR https://archimer.ifremer.fr/doc/00188/29894/28333.pdf
LA English
DT Article
DE ;Pénéidé;vitellogénine;vitelline;immuno-essai (ELISA);anticorps;Penaeid;vitellogenin;vitellin;immunoassay (ELISA);antibody
AB La vitellogénine (VTG) de Penaeus vannamei a été purifiée à partir d'hémolymphe par une procédure en trois étapes comprenant l'ultracentrifugation, la filtration sur gel et la chromatographie d'échange d'ions. Un essai compétitif en deux étapes a été développé par lequel la VTG peut être quantifiée en fonction de sa capacité d'inhiber la liaison de l'anticorps à la VTG préalablement adsorbée à une phase solide. La sensibilité pour des essais en équilibre et non-équilibre a été respectivement de 41 et de 2,3 ng/ml. Les coefficients de variation intra-essai et inter-essais ont été respectivement de 4,2 et 9,6 %. Les courbes d'inhibition pour des dilutions de I'hémolymphe de femelles en cours de vitellogenèse, d'homogénats d'ovaire de ces dernières et de vitelline (VTL) purifiée ont été parallèles à la courbe étalon de VTG; en revanche, l'hémolymphe de femelles sexuellement immatures et de mâles n'ont pas montrée de réactivité croisée. Les anticorps dirigés contre la VTG ne reconnaissent que partiellement la VTL comme l'ont montré les courbes de déplaccmcnt. Les épreuves de surcharge ont été approximativement de 100 %. Ainsi la procédure a été considérée comme adéquate pour mesurer la VTG hémolymphatique. Le test enzymatique immuno-adsorbant (ELISA) développé dans cette étude a été validé physiologiquement en détectant des variations de VTG chez des crevettes femelles nourries avec des extraits de calmar.
AB Vitellogenin (VTG) was isolated from the haemolymph of Penaeus vannamei by a three step procedure including ultracentrifugation, gel filtration and ion exchange chromatography. VTG was used to raise polyclonal antibodies that were purified by ion exchange chromatography. A two step competitive assay was developed in which VTG could be quantitated by its capacity to inhibit the binding of antibody to the VTG previously adsorbed onto a solid phase. Sensitivity from equilibrium and from non-equilibrium assays was 41 and 2.3 ng/ml respectively. Estimates of within-assay and between-assay variabilities of standard curves were 4.2 and 9.6% respectively. The inhibition curves for dilutions of haemolymph from vitellogenic females, egg yolk extracts and purified vitellin (VTL) were parallel to the standard VTG curve, haemolymph from immature females and males showed no cross-reactivity. The antibodies directed against VTG recognize but partially VTL as shown by displacement curves. Recovery tests were near 100%. Thus the procedure was considered to be suitable for the measurement of haemolymphatic VTG. The VTG enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) developed in this study was validated by detecting physiological VTG changes in female shrimps after being fed squid extracts.
PY 1993
PD JAN
SO Aquatic Living Resources
SN 0990-7440
PU Edp Sciences S A
VL 6
IS 1
UT 000208265600004
BP 39
EP 48
DI 10.1051/alr:1993004
ID 29894
ER

EF